平行反应监测PRM服务
213 人阅读发布时间:2021-04-27 15:24
平行反应监测PRM服务
平行反应监测(PRM)是一种基于高分辨率和高精度质谱的离子监测技术。PRM技术的原理与SRM/MRM的原理类似,但在分析方法的开发中,PRM更常用于对蛋白质和多肽进行绝对定量。PRM技术能实现复杂样品中的attomole级别的多种蛋白质的检测。
平行反应监测(PRM)
PRM是以Q-Orbitrap为基础的四极杆高分辨率质谱检测平台。与SRM每次执行一次跃迁不同,PRM通过前体离子对每次跃迁执行全扫描,也就是说,同时监控前体离子的所有碎片:首先,PRM采用四极(Q1)选择前驱体离子,选择范围一般为m/z≤2;然后,前体离子在碰撞细胞中破碎(Q2);最后,Orbitrap取代Q3,高分辨率和高精度的扫描所有破碎的离子。因此,PRM技术不仅具有SRM/MRM目标的定量分析能力,而且还具有定性能力。
PRM的优势
1.质量精度可达到ppm级别,比SRM / MRM更好的消除了背景干扰和假阳性问题,有效提高复杂背景下的检测限和灵敏度;
2.对产物离子进行全扫描,无需选择离子对,更易于分析方法的建立;
3.较宽的线性范围:增加到5-6个数量级。
SRM / MRM技术的优势
• 高灵敏度;
• 高产量;
• 分析方法更易于开发。
百泰派克生物科技平行反应监测PRM分析主要流程:
1.PRM分析法开发:首先,从质谱库中生成或Skyline软件中选择2种或3种靶向肽。所选的肽对于目标蛋白质应该是唯一的,易于通过LC-MS进行的检测,不能有缺失的切割位点和多次修饰的氨基酸。其次,根据x轴-浓度比,y轴-峰面积比,建立一条标准曲线。
2.质谱分析:水解后的样品,使用Thermo公司最新的Obitrap Fusion Lumos质谱仪对样品进行质谱分析。
3.数据分析:使用Skyline软件进行数据分析。
PRM的应用
• iTRAQ中差异蛋白的验证;
• Label Free无标记差异蛋白的验证;
• 多肽和蛋白质绝对定量;
• 量化疾病指标,建立诊断模型;
• 磷酸化蛋白定量,甲基化蛋白定量;
• 其他翻译后修饰蛋白质定量;
• 代谢通路定量分析。
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关于百泰派克
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP)成立于2015年,是国家级高新技术企业,业务范围主要围绕蛋白和小分子代谢物检测两大板块,从事蛋白质和小分子代谢物的理化性质分析及结构解析等相关技术服务,为客户提供高性价比、高效率的技术服务。深耕蛋白鉴定、定量蛋白组(iTRAQ/TMT、label free、DIA/SWATCH)、PRM靶蛋白定量、蛋白和抗体测序、蛋白修饰(二硫键、糖基化、磷酸化、乙酰化、泛素化等)、靶向和非靶向代谢物检测。
百泰派克生物科技检测平台包括:检测分析平台、蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白质从头测序平台、生物制药分析平台和流式细胞多因子检测平台。公司拥有独立的质谱实验室、色谱实验室、细胞培养室和免疫学实验室,以及高分辨率质谱仪和高效液相色谱。目前已与国内外多家药物研发企业,以及哈佛大学、北京大学在内的国内外高校建立了合作关系,协助客户发表了多篇中英文文章,包括Cell等多家高水平期刊。
公司自主检测平台发展至今,已覆盖蛋白质组学、代谢组学、生物制药、生信分析等多组学检测平台,积累了丰富的实践经验,凭借专业的技术和优质的服务水平,客户覆盖北京大学、清华大学、中科院等多所知名院校,也与国内外多家药物研发企业建立合作关系。公司始终致力于为各科研院校、企业和机构提供高效、准确、高性价比的蛋白质(组)研究技术包裹,助力客户在基础研究、分子诊断及其他生命科学研究领域取得突破,为生命科学的发展做出贡献。
百泰派克技术平台
检测分析平台:多台高分辨率质谱仪、高效液相色谱、气相色谱,NMR。
蛋白质组分析平台:Label-free、iTRAQ、SILAC、SWATH、MRM;蛋白质定性定量鉴定、蛋白质差异分析、发现疾病标记物、发现药物靶标。
代谢组分析平台:靶向代谢组学、非靶向代谢组学、脂质组学分析;通量达1000种代谢分子、代谢通路分析、代谢靶标鉴定。流式细胞多因子检测平台:CBA、FlowCytomix;微量样品需求,分析多种细胞因子。
蛋白质从头测序平台:Obitrap Fusion Lumos质谱仪、PEAKS软件分析;100%序列测定,精准蛋白、抗体测序。
生物制药分析平台:生物药物鉴定、变异性分析、纯度分析。
流式细胞多因子检测平台:CBA、FlowCytomix;微量样品需求,分析多种细胞因子。