CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析
282 人阅读发布时间:2021-04-27 11:19
CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析
免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)技术是一种通过使用能够与蛋白质结合的抗体从溶液中分离出特定蛋白质的技术,是抗原纯化和检测中使用最广泛的方法之一。通过添加不溶形式的抗体结合蛋白(例如与琼脂糖浆液或新近流行的磁珠缀合的蛋白A或Protein G)从溶液中去除抗体-蛋白复合物。免疫沉淀法使用抗原特异性抗体从复合抗原溶液中分离目标抗原,并使用聚丙烯酰胺凝胶SDS-PAGE法分析复合蛋白混合物中存在的抗体反应性抗原的数量和大小。免疫沉淀IP使研究人员能够测量蛋白质混合物中给定蛋白质的分子量和数量,识别蛋白质激活状态和翻译后蛋白质修饰,并捕获蛋白质结合伴侣。免疫沉淀测定法可检测靶蛋白与其他蛋白或核酸的相互作用,其中免疫共沉淀法Co-IP蛋白互作分析法常用作靶蛋白的检测。
Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法是一项功能强大的技术,广泛应用于发现和检测蛋白质-蛋白质相互作用。Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法的原理是利用抗原-抗体相互作用拉下靶蛋白的方式推定相互作用的蛋白。具体而言,将目标蛋白的抗体固定在亲和树脂中,然后将其暴露于设计的蛋白混合物或细胞提取液中,与目标蛋白质有强相互作用的蛋白质或蛋白质复合物将被共沉淀。 这些相互作用蛋白的身份和数量可以通过后续基于质谱的互作蛋白质谱分析方法进行鉴定。
百泰派克标准Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法的一般程序如下:
• 制备蛋白质混合物,细胞裂解液或组织提取物
• 用抗体结合的亲和珠孵育蛋白质混合物,细胞裂解物或组织提取物
• 通过多个洗涤步骤清除未结合的蛋白质
• 通过SDS-PAGE,蛋白质印迹或质谱(MS)分析检测相互作用蛋白
*百泰派克提供基于质谱的CO-IP样品蛋白质谱鉴定,详情参见:基于质谱的互作蛋白质谱分析方法
与其他蛋白质相互作用方法相比,Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法具有以下优势:
• 目标蛋白以其天然状态被下拉,从而减少了人为因素的影响;
• 可以拉到完整的蛋白质复合物,对于蛋白质及其功能途径的表征非常有用;
• 与多种样品制备和蛋白质鉴定方法高度兼容;
• 操作简单明了。
百泰派克生物科技为客户提供优质的Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析服务。 我们针对样品蛋白的提取,表达和纯化的优化方案可确保获得高质量的诱饵和猎物蛋白。此外,我们提供定制方法可用于表征潜在的相互作用蛋白。
为节省您的宝贵时间和预算,百泰派克提供一站式Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法检测服务,涵盖您项目的每个步骤,包括:
实验设计-基因合成-蛋白质表达和纯化-抗体培养和固定-细胞裂解液的制备
CO-IP免疫共沉淀法用于蛋白互作分析
互作蛋白质谱鉴定-数据分析-出具中英文报告-免费咨询
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关于百泰派克
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP)成立于2015年,是国家级高新技术企业,业务范围主要围绕蛋白和小分子代谢物检测两大板块,从事蛋白质和小分子代谢物的理化性质分析及结构解析等相关技术服务,为客户提供高性价比、高效率的技术服务。深耕蛋白鉴定、定量蛋白组(iTRAQ/TMT、label free、DIA/SWATCH)、PRM靶蛋白定量、蛋白和抗体测序、蛋白修饰(二硫键、糖基化、磷酸化、乙酰化、泛素化等)、靶向和非靶向代谢物检测。
百泰派克生物科技检测平台包括:检测分析平台、蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白质从头测序平台、生物制药分析平台和流式细胞多因子检测平台。公司拥有独立的质谱实验室、色谱实验室、细胞培养室和免疫学实验室,以及高分辨率质谱仪和高效液相色谱。目前已与国内外多家药物研发企业,以及哈佛大学、北京大学在内的国内外高校建立了合作关系,协助客户发表了多篇中英文文章,包括Cell等多家高水平期刊。
公司自主检测平台发展至今,已覆盖蛋白质组学、代谢组学、生物制药、生信分析等多组学检测平台,积累了丰富的实践经验,凭借专业的技术和优质的服务水平,客户覆盖北京大学、清华大学、中科院等多所知名院校,也与国内外多家药物研发企业建立合作关系。公司始终致力于为各科研院校、企业和机构提供高效、准确、高性价比的蛋白质(组)研究技术包裹,助力客户在基础研究、分子诊断及其他生命科学研究领域取得突破,为生命科学的发展做出贡献。
百泰派克技术平台
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代谢组分析平台:靶向代谢组学、非靶向代谢组学、脂质组学分析;通量达1000种代谢分子、代谢通路分析、代谢靶标鉴定。流式细胞多因子检测平台:CBA、FlowCytomix;微量样品需求,分析多种细胞因子。
蛋白质从头测序平台:Obitrap Fusion Lumos质谱仪、PEAKS软件分析;100%序列测定,精准蛋白、抗体测序。
生物制药分析平台:生物药物鉴定、变异性分析、纯度分析。
流式细胞多因子检测平台:CBA、FlowCytomix;微量样品需求,分析多种细胞因子。
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