基于SDS-PAGE的蛋白分离

十二烷基硫酸钠聚丙烯酰氨凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE）在蛋白表达分析等科研工作中经常用到。可用于获取蛋白质样品的电泳图谱，结合其它基于质谱的蛋白质鉴定服务对样品进行分析或纯化，用于复杂生物样品的蛋白质谱分析。

百泰派克生物科技可根据您的需求，提供基于1D SDS-PAGE或2D SDS-PAGE的蛋白分离服务：基于我司优化的标准操作流程，使用Bio-Rad Mini-PROTEAN® Tetra凝胶系统进行1D SDS-PAGE蛋白质分离。将蛋白样品(5-20ug)用上样缓冲液稀释到一定浓度并加热（沸水浴5 min），根据样品的分析目的选择适当浓度的凝胶并将样品上样到凝胶孔中，加入电泳缓冲液，首先在80V电压下恒压分离15min，然后在120V电压下恒压分离60 min。分离后卸下胶板，将凝胶用考马斯亮蓝染色或银染染色。

2D SDS-PAGE蛋白分离使用IPG（pH 3-10）胶进行一维等电点聚焦，SDS-PAGE胶二维电泳进行Mw分离，实现蛋白分离。样品首先使用超滤管进行纯化，并将溶液体系替换为2D lysis buffer (30 mM Tris- HCl, pH 8.8, containing 7 M urea, 2 M thiourea and 4% CHAPS)进行等电点聚焦。聚焦好的胶条胶面朝上放在干的厚滤纸上，挤去多余水分、矿物油及多余样品，用缓冲液溶胀15 min后，将胶条继续在平衡缓冲液中平衡15 min。将胶条胶面朝上放在凝胶的长玻璃板上，使用低熔点琼脂糖封胶后，将凝胶转移至电泳槽中，起始使用低电压，待样品在完全走出IPG胶条，浓缩成一条线后，加大电压，待溴酚蓝指示剂达到底部边缘时即可停止电泳。卸下胶板，将凝胶用考马斯亮蓝染色、银染染色或荧光染色。使用Typhoon TRIO (GE Healthcare)对胶图进行扫描，扫描得到的胶图通过Image Quant software (version 6.0, GE Healthcare)和DeCyder 5.0 (GE Healthcare)进行分析。

百泰派克2D SDS-PAGE示例

关于样品：

1. 液体或固体样品均可。
2. 1D SDS-PAGE一般需要2-30µg蛋白，2D SDS-PAGE一般需要50-1000µg蛋白。
3. 考马斯亮蓝染色、银染染色或荧光染色的蛋白质均可。
How to order?


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关于百泰派克

北京百泰派克生物科技有限公司（Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP）成立于2015年，是国家级高新技术企业，业务范围主要围绕蛋白和小分子代谢物检测两大板块，从事蛋白质和小分子代谢物的理化性质分析及结构解析等相关技术服务，为客户提供高性价比、高效率的技术服务。深耕蛋白鉴定、定量蛋白组（iTRAQ/TMT、label free、DIA/SWATCH）、PRM靶蛋白定量、蛋白和抗体测序、蛋白修饰（二硫键、糖基化、磷酸化、乙酰化、泛素化等）、靶向和非靶向代谢物检测。

百泰派克生物科技检测平台包括：检测分析平台、蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白质从头测序平台、生物制药分析平台和流式细胞多因子检测平台。公司拥有独立的质谱实验室、色谱实验室、细胞培养室和免疫学实验室，以及高分辨率质谱仪和高效液相色谱。目前已与国内外多家药物研发企业，以及哈佛大学、北京大学在内的国内外高校建立了合作关系，协助客户发表了多篇中英文文章，包括Cell等多家高水平期刊。

公司自主检测平台发展至今，已覆盖蛋白质组学、代谢组学、生物制药、生信分析等多组学检测平台，积累了丰富的实践经验，凭借专业的技术和优质的服务水平，客户覆盖北京大学、清华大学、中科院等多所知名院校，也与国内外多家药物研发企业建立合作关系。公司始终致力于为各科研院校、企业和机构提供高效、准确、高性价比的蛋白质（组）研究技术包裹，助力客户在基础研究、分子诊断及其他生命科学研究领域取得突破，为生命科学的发展做出贡献。
 

百泰派克技术平台

检测分析平台：多台高分辨率质谱仪、高效液相色谱、气相色谱，NMR。
蛋白质组分析平台：Label-free、iTRAQ、SILAC、SWATH、MRM；蛋白质定性定量鉴定、蛋白质差异分析、发现疾病标记物、发现药物靶标。
代谢组分析平台：靶向代谢组学、非靶向代谢组学、脂质组学分析；通量达1000种代谢分子、代谢通路分析、代谢靶标鉴定。流式细胞多因子检测平台：CBA、FlowCytomix；微量样品需求，分析多种细胞因子。
蛋白质从头测序平台：Obitrap Fusion Lumos质谱仪、PEAKS软件分析；100%序列测定，精准蛋白、抗体测序。
生物制药分析平台：生物药物鉴定、变异性分析、纯度分析。
流式细胞多因子检测平台：CBA、FlowCytomix；微量样品需求，分析多种细胞因子。