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技术资料/正文
膜蛋白鉴定服务
89 人阅读发布时间：2021-04-27 11:11
膜蛋白鉴定服务
膜蛋白（如受体和离子通道）是细胞功能的关键调节剂。膜蛋白占已知可药用靶标的三分之二，可见膜蛋白在生物制药行业中的重要性。其中G蛋白偶联受体（GPCR）是最大的，用途最广泛的膜受体类蛋白，也是最重要的药物受体，占所有人类药物靶标的50％以上，并作为包括癌症在内的多种疾病的治疗靶标，包括心血管、代谢、中枢神经系统和炎症性等疾病。
离子通道代表着另一组重要的膜蛋白药物靶标，占目前上市药物的10％。尽管如此，制备出数量足够的、纯正的、折叠形式正确的膜受体用于药物开发仍然是一大挑战。
膜蛋白鉴定
BTP-膜蛋白鉴定服务一般流程：
1. 从细胞质、周质或细胞培养上清液中纯化膜蛋白。根据所使用的表达宿主或表达载体，从细胞质、（细菌）周质或细胞培养上清液中纯化蛋白质。2. 缓冲液和去污剂筛选，用于增加溶解度和纯化。对于可溶性蛋白和膜蛋白，使用视差扫描荧光法（DSF）确定稳定性最佳的缓冲液的条件。如果适用，建立的活性分析法可用以关联稳定性和活性状态。对于膜或膜附着蛋白，在从细菌或真核生物膜中提取蛋白时需要使用去污剂。去污剂的使用，需要在提取和纯化步骤中针对蛋白质稳定性进行优化。如果蛋白质表达为包涵体，完成了再溶解和重折叠，可对最佳去污剂和缓冲液条件进行优化。
3. 使用His、Rho1D4、GST或strep标签进行亲和纯化。使用我们的高质量亲和纯化基质可以纯化与His，GST或Strep标签等标签融合的蛋白质。对于膜蛋白，我们建议使用Rho1D4系统，也可根据需求使用其他标签进行纯化。我司的纯化条件进行了优化，可根据目标蛋白的不同，可以放大至毫克量的纯化。服务可包括缓冲液和去污剂的优化，以提供具有最佳稳定性和活性的蛋白质。百泰派克生物会提供所有步骤的详尽文档，包括SDS-PAGE和Western Blot等数据。
进一步纯化步骤可用于准备结晶的均一性蛋白质组分。为了获得适合于，如蛋白质结晶实验或功能结合测定的蛋白质，可以使用例如阴离子或阳离子交换色谱或凝胶过滤进行第二或第三纯化步骤。
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关于百泰派克
北京百泰派克生物科技有限公司（Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP）成立于2015年，是国家级高新技术企业，业务范围主要围绕蛋白和小分子代谢物检测两大板块，从事蛋白质和小分子代谢物的理化性质分析及结构解析等相关技术服务，为客户提供高性价比、高效率的技术服务。深耕蛋白鉴定、定量蛋白组（iTRAQ/TMT、label free、DIA/SWATCH）、PRM靶蛋白定量、蛋白和抗体测序、蛋白修饰（二硫键、糖基化、磷酸化、乙酰化、泛素化等）、靶向和非靶向代谢物检测。百泰派克生物科技检测平台包括：检测分析平台、蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白质从头测序平台、生物制药分析平台和流式细胞多因子检测平台。公司拥有独立的质谱实验室、色谱实验室、细胞培养室和免疫学实验室，以及高分辨率质谱仪和高效液相色谱。目前已与国内外多家药物研发企业，以及哈佛大学、北京大学在内的国内外高校建立了合作关系，协助客户发表了多篇中英文文章，包括Cell等多家高水平期刊。
公司自主检测平台发展至今，已覆盖蛋白质组学、代谢组学、生物制药、生信分析等多组学检测平台，积累了丰富的实践经验，凭借专业的技术和优质的服务水平，客户覆盖北京大学、清华大学、中科院等多所知名院校，也与国内外多家药物研发企业建立合作关系。公司始终致力于为各科研院校、企业和机构提供高效、准确、高性价比的蛋白质（组）研究技术包裹，助力客户在基础研究、分子诊断及其他生命科学研究领域取得突破，为生命科学的发展做出贡献。
百泰派克技术平台
检测分析平台：多台高分辨率质谱仪、高效液相色谱、气相色谱，NMR。蛋白质组分析平台：Label-free、iTRAQ、SILAC、SWATH、MRM；蛋白质定性定量鉴定、蛋白质差异分析、发现疾病标记物、发现药物靶标。
代谢组分析平台：靶向代谢组学、非靶向代谢组学、脂质组学分析；通量达1000种代谢分子、代谢通路分析、代谢靶标鉴定。流式细胞多因子检测平台：CBA、FlowCytomix；微量样品需求，分析多种细胞因子。
蛋白质从头测序平台：Obitrap Fusion Lumos质谱仪、PEAKS软件分析；100%序列测定，精准蛋白、抗体测序。
生物制药分析平台：生物药物鉴定、变异性分析、纯度分析。
流式细胞多因子检测平台：CBA、FlowCytomix；微量样品需求，分析多种细胞因子。