蛋白质水解

自然界中发现的蛋白质大小从5 kDa到400 kDa不等。蛋白质水解过程将蛋白质切成较短片段，即肽段，蛋白质水解是肽质谱鉴定分析之前至关重要的一步，是蛋白质鉴定和表征、生物标记物的发现成功进行的基础。尽管质谱可以研究完整的蛋白质，但是较小的肽更容易进行蛋白质鉴定。且可提高蛋白质的覆盖率，因为蛋白质覆盖率由于溶解性和异质性可能会降低。因此，最常见的蛋白质组学方法往往会利用位点特异性酶切位点来产生较小的多肽片段。质量较小的肽段更容易通过高效液相色谱（HPLC）和HLPC偶联质谱进行分离和表征。
百泰派克基于质谱的蛋白鉴定示例

BTP-蛋白质水解服务

百泰派克生物科技提供两种水解蛋白质的方法：（1）凝胶内水解（聚丙烯酰胺凝胶基质中的蛋白质水解）；（2）溶液内水解（蛋白质在氯仿/甲醇中沉淀，然后在尿素中再溶解后进行）。通过一维或二维凝胶电泳分离的蛋白质，可直接在凝胶内进行水解，凝胶内水解，有效且可重现好，但比较费力费时。相较于凝胶内水解，溶液内水解方法更省力，所需的时间较少，但溶液内水解的蛋白，蛋白的再溶解度低，可能会导致一定的样品损失。

蛋白质水解的流程

百泰派克生物科技可同时提供凝胶内水解和溶液内水解两种蛋白质水解相关服务。蛋白质水解的工作流程包括：

1. 制备裂解液；
2. 溶液内或凝胶内进行酶切;
3. 使用离液剂（如尿素和胍）使蛋白质变性；
4. 使用DTT还原二硫键；
5. 使用碘乙酸或碘乙酰胺将半胱氨酸烷基化；
6. 去除试剂和交换缓冲液；
7. 在适当的pH和温度下，用胰蛋白酶或其他蛋白酶在碳酸氢铵缓冲液中过夜变性约18小时；
8. 加入酸类物质终止酶切。
9. 蛋白质富集/清洗。
蛋白质水解的工作流程
样品要求

百泰派克生物科技可处理各种类型的样本，包括但不限于：

天然来源的蛋白质；
重组来源的融合蛋白和标记蛋白；
不同亚型的抗体；
膜蛋白及其他。

蛋白质酶切的优点

• 灵活性：我们提供凝胶内和溶液内水解两种蛋白质水解策略；
• 高准确性和覆盖范围：我们的水解服务可以大大提高质谱分析的准确性和覆盖范围。
• 应用广泛：可促进蛋白质的鉴定和表征，发现疾病的生物标志物，并有助于理解生物学过程。
• 完整的蛋白质组学服务：我们提供完整的蛋白质组学服务，涵盖蛋白质组学分析的整个过程，可对水解后的样品进行分析测定，一站式为您解决组学问题。

百泰派克生物科技还提供高通量自动化蛋白质水解服务，欢迎咨询。
How to order?

 

 

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关于百泰派克

北京百泰派克生物科技有限公司（Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP）成立于2015年，是国家级高新技术企业，业务范围主要围绕蛋白和小分子代谢物检测两大板块，从事蛋白质和小分子代谢物的理化性质分析及结构解析等相关技术服务，为客户提供高性价比、高效率的技术服务。深耕蛋白鉴定、定量蛋白组（iTRAQ/TMT、label free、DIA/SWATCH）、PRM靶蛋白定量、蛋白和抗体测序、蛋白修饰（二硫键、糖基化、磷酸化、乙酰化、泛素化等）、靶向和非靶向代谢物检测。

百泰派克生物科技检测平台包括：检测分析平台、蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白质从头测序平台、生物制药分析平台和流式细胞多因子检测平台。公司拥有独立的质谱实验室、色谱实验室、细胞培养室和免疫学实验室，以及高分辨率质谱仪和高效液相色谱。目前已与国内外多家药物研发企业，以及哈佛大学、北京大学在内的国内外高校建立了合作关系，协助客户发表了多篇中英文文章，包括Cell等多家高水平期刊。

公司自主检测平台发展至今，已覆盖蛋白质组学、代谢组学、生物制药、生信分析等多组学检测平台，积累了丰富的实践经验，凭借专业的技术和优质的服务水平，客户覆盖北京大学、清华大学、中科院等多所知名院校，也与国内外多家药物研发企业建立合作关系。公司始终致力于为各科研院校、企业和机构提供高效、准确、高性价比的蛋白质（组）研究技术包裹，助力客户在基础研究、分子诊断及其他生命科学研究领域取得突破，为生命科学的发展做出贡献。
 

百泰派克技术平台

检测分析平台：多台高分辨率质谱仪、高效液相色谱、气相色谱，NMR。
蛋白质组分析平台：Label-free、iTRAQ、SILAC、SWATH、MRM；蛋白质定性定量鉴定、蛋白质差异分析、发现疾病标记物、发现药物靶标。
代谢组分析平台：靶向代谢组学、非靶向代谢组学、脂质组学分析；通量达1000种代谢分子、代谢通路分析、代谢靶标鉴定。流式细胞多因子检测平台：CBA、FlowCytomix；微量样品需求，分析多种细胞因子。
蛋白质从头测序平台：Obitrap Fusion Lumos质谱仪、PEAKS软件分析；100%序列测定，精准蛋白、抗体测序。
生物制药分析平台：生物药物鉴定、变异性分析、纯度分析。
流式细胞多因子检测平台：CBA、FlowCytomix；微量样品需求，分析多种细胞因子。