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重组蛋白疫苗N端序列分析

76 人阅读发布时间:2023-09-24 09:29

重组蛋白疫苗是一类不包含完整病原tǐ,并由异源表达系统中生产的特定蛋白质抗原配制而成的一类疫苗。常见的异源表达系统有:细菌、哺乳动物细胞、植物细胞和昆虫细胞等,往往需要根据所生产的抗原种类选择合适的异源表达系统。重组蛋白疫苗由于其具有安全性好、稳定性强以及成本较低等几大优势,近年来也受到研究者们的广泛青睐。目前,重组蛋白疫苗已被广泛应用于多种传染病,如预防乙型病毒性肝炎(即乙肝)、破伤风、百日咳、流行性感冒等等。重组蛋白疫苗结构的理解对于了解其功能和稳定性至关重要。

重组蛋白疫苗的活性成分为重组蛋白质,这些蛋白质的序列与结构特性直接影响疫苗的免疫原性和效果。N端序列,即蛋白质的氨基末端序列,是重组蛋白质的重要特性之一。对其进行分析可以帮助确认重组蛋白质是否正确地被表达和修饰,因此对于疫苗的质量控制至关重要。目前,N端测序通常使用埃德曼降解法进行。这种方法是通过连续的化学反应,逐个去除抗tǐ的N端氨基suān,并对每个去除的氨基suān进行识别。这个过程可以重复进行,直到得到足够长的氨基suān序列。然而,这种方法比较耗时,并且需要足够大量的抗tǐ样品。

技术资料图片1

技术资料图片2

生物制品表征N端测序示意图

除了埃德曼降解法,质谱技术(尤其是串联质谱)也被广泛用于重组蛋白疫苗的氨基suān序列分析,质谱法将抗tǐ蛋白消化成5-25个氨基suān的肽,随即通过LC-MS/MS分析检测,将采集的数据与理论序列数据库进行匹配,进而确认N端序列。质谱可以测出封闭和修饰的重组蛋白疫苗N末端,且已成为shǒu选的全长抗tǐ测序方法。埃德曼降解法与质谱法不同,其不需要借助蛋白数据库便可以直接进行序列分析。但它不能用于N-末端封闭或修饰后的氨基suān残基。

百泰派克生物科技(BTP),采用ISO9001认证质量控制tǐ系管理实验室,获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务。我们可为您提供基于高分辨质谱平台以及岛津公司埃德曼测序系统的重组蛋白疫苗N端序列分析服务。以质谱为基础的N端测序技术可以实现对N端封闭和PEG化蛋白的序列测定,与埃德曼测序形成互补。此分析可以用于确认重组蛋白是否得到完整表达,检测重组蛋白表达过程是否发生断裂,以及重组蛋白N端序列是否发生修饰等。百泰派克生物科技(BTP)还可根据需求提供定制化技术服务,欢迎免费咨询。

百泰派克生物科传统疫苗表征内容

技术资料图片3

 

百泰派克生物科技-生物药物表征,生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。
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