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34 人阅读发布时间:2025-04-08 11:41
TMT (Tandem Mass Tag) 标记定量蛋白质组学是一种先进的质谱技术,用于定量分析不同样本中的蛋白质表达差异。这种技术的核心是使用TMT标签来标记蛋白样本。在此过程中,来自不同条件或处理的蛋白样本被分别与不同的TMT标签结合。这些标签质量不同,但结构相似,这允许在质谱分析中区分不同样本中的相同蛋白。
图1. 基于TMT的蛋白质组学服务工作流程
TMT特点及应用
与无标记定量相比:TMT利用添加到样品中的不同标记来区分和定量蛋白质,从而可以在一次运行中同时分析和比较多个样品。 TMT的数据采集模式是单次运行,。与使用独特的基于肽的数据依赖性采集(DDA)模式的传统无标记定量相比,TMT 提供更少的缺失值和更完整的数据记录。无标记定量在检测多批次样品时通常会遇到重现性差的问题,而与无标记技术相比,TMT 可以通过分级分离识别更多蛋白质。然而,由于 DDA 扫描模式的限制,低丰度蛋白质的代表性可能不足。此外,动态范围压缩的存在可能会导致量化值低于实际值,从而使准确量化差异表达的蛋白质变得具有挑战性。可同时对多达16个样本进行定量
因此,基于标记的定量,例如TMT,更适合比较经过不同处理或不同时间点、具有相似背景(例如相同物种和样本类型)的小样本(最多16个)之间的共享蛋白质。然而,它不适合鉴定样品中是否存在蛋白质。TMT标记定量蛋白质组学技术在生物医学研究、药物开发和疾病诊断中有着广泛的应用: