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77 人阅读发布时间:2025-06-26 11:24
蛋白质磺酸修饰是一种不太常见但非常重要的蛋白翻译后修饰方式。它涉及将磺酸基团添加到蛋白质的特定氨基酸残基上,通常是酪氨酸残基。与磷酸化不同,磺酸化是一个共价的永久修饰。
图1. 蛋白质翻译后修饰方式鉴定示意图
常用的检测蛋白质磺酸化方法主要有:
1、质谱分析 (Mass Spectrometry, MS):
由于磺酸化导致的质量增加,LC-MS/MS可以用来鉴定磺酸化位点。但是,磺酸化肽在MS中可能会失去磺酸基团,这使得鉴定变得具有挑战性。MS的数据解释通常需要特定的生物信息学工具,以确保正确鉴定磺酸化位点。
2、Western Blot与磺酸化特异性抗体:
使用针对磺酸化蛋白或磺酸化位点的特异性抗体可以通过Western Blot方法检测磺酸化状态。
3、免疫荧光染色:
使用磺酸化特异性抗体,可以通过免疫荧光染色在细胞或组织切片上定位磺酸化蛋白。
4、酶联免疫吸附试验 (ELISA):
使用磺酸化特异性抗体可以设计ELISA,对磺酸化蛋白进行量化分析。