Tau蛋白的泛素化鉴定流程

Tau蛋白是一种微管相关蛋白，主要存在于神经细胞中，并参与微管的稳定化。在某些神经退行性疾病，如阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，AD）中，Tau蛋白可能会异常磷酸化和聚集，形成所谓的Tau团块或神经纤维缠结。

泛素化是一种蛋白质的翻译后修饰，涉及将一个或多个泛素分子连接到目标蛋白上。这种修饰通常会标记蛋白质进行降解，但也参与许多其他细胞过程。

图1. 泛素化修饰研究路线

Tau蛋白的泛素化鉴定主要是为了确定Tau蛋白是否被泛素化，以及在哪些位点上发生泛素化。以下是基本步骤：

1、样品制备： 从相关的细胞或组织中提取Tau蛋白。

2、免疫沉淀： 使用针对Tau蛋白的抗体进行免疫沉淀，从样品中富集Tau蛋白。

3、蛋白质电泳： 通过SDS-PAGE对沉淀的蛋白进行分离。

4、免疫印迹分析： 使用针对泛素的抗体进行免疫印迹（Western Blot）分析，检测Tau蛋白是否被泛素化。

5、质谱分析： 为了准确鉴定Tau蛋白上的泛素化位点，可以进一步进行质谱分析。

6、数据解析： 根据质谱数据解析Tau蛋白的泛素化位点。

Tau蛋白的泛素化与其在疾病中的聚集和降解机制可能相关，因此对其进行鉴定对于理解神经退行性疾病的分子机制是非常重要的。