单克隆抗体糖型分析的常用方法

单克隆抗体（mAbs）由单一的B淋巴细胞克隆产生，它们与特定的抗原有高度特异性的结合。除了蛋白质结构，单克隆抗体的糖链也对其功能、生物分布、免疫原性和稳定性有重要影响。因此，对单克隆抗体的糖型进行分析是药物开发中的一个关键步骤。

以下是常用的单克隆抗体糖型分析方法：

1.毛细管电泳-质谱联用（CE-MS）：

这种方法特别适合于分析N-糖型。毛细管电泳用于分离糖型，而质谱用于结构鉴定。

2.液相色谱-质谱联用（LC-MS）：

可以用于分析N-糖和O-糖。首先利用酶解或化学方法从抗体上释放糖，然后使用液相色谱进行分离和质谱进行结构鉴定。

3.荧光标记和HPLC分析：

糖链首先被释放并与荧光标签反应，然后使用HPLC进行分离和定量。

4.糖凝集素结合测定（Lectin Blotting）：

使用特定的糖凝集素与特定糖结构结合，可以用于鉴定特定的糖型结构。

5.NMR（核磁共振）：

可以提供关于糖结构的详细信息，但需要较大的样品量，并且技术要求较高。

6.酶联免疫吸附试验 (ELISA)：

使用特定的糖型结合蛋白或抗体来检测和定量糖链。

每种技术都有其优势和限制。选择哪种方法通常取决于分析的目的、样品的可用量、所需的灵敏度和分辨率以及可用的仪器设备。在药物开发的不同阶段，可能需要使用多种技术来全面评估产品的糖型异质性和一致性。

图1