翻译后蛋白修饰脱酰胺检测

蛋白翻译后修饰 (PTM, post-translational modification) 指的是在蛋白质翻译后发生的化学修饰，这些修饰可以影响蛋白质的活性、稳定性、亲和力、半衰期和细胞内的定位。

脱酰胺是指蛋白质在翻译后失去酰胺基团（通常是去除氨基酸侧链上的酰胺基），这种改变可能影响蛋白质的结构、定位、功能以及与其他分子的相互作用。例如，在神经递质释放、细胞信号传递等过程中，脱酰胺修饰的蛋白质起着调节作用。因此，准确检测和理解脱酰胺修饰对于揭示细胞机制至关重要。

图1.蛋白质脱酰胺化修饰过程

传统上，脱酰胺修饰的检测是一个挑战，因为这种修饰往往是微妙且不稳定的。然而，随着质谱技术的发展，特别是液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）的应用，研究人员现在能够更准确地识别和定量这些修饰。通过精确测量蛋白质或肽段的质量变化，可以推断出脱酰胺事件的发生。

此外，结合特定的酶切策略和富集方法，如使用特异性抗体富集脱酰胺修饰的蛋白质或肽段，可以提高检测的灵敏度和特异性。这些技术的结合使得研究人员能够在复杂的生物样本中，如细胞提取物或体液中，探测到微量的脱酰胺修饰。