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588 人阅读发布时间:2019-05-06 15:22

服务项目
蛋白质糖型分析
蛋白质糖基化位点分析
糖基化位点及该位点糖型分析
更多技术服务,请访问官网:http://www.biotech-pack.com/
活动时间
2019.05.01 至 2019.05.15
活动详情
活动期间凡是订购以上服务项目:
1. 单笔订单满30000元,即可赠送价值100元京东购物券
2. 单笔订单满50000元,即可赠送数据分析服务
更多促销详情,敬请咨询:010-57231915
活动规则
1. 本项优惠活动不可与其他活动同享;
2. 本活动最终解释权归北京百泰派克生物科技有限公司所有。
研究流程
一. 蛋白质糖型分析
1. 利用PNGase F酶解释放目标蛋白中的N-糖链;
2. 以2-AA对N-糖链进行标记,SPE柱特异性富集N-糖链;
3. 根据目标蛋白糖基化的复杂程度,选用MALDI-TOF-TOF或 LC-MS/MS检测2-AA标记的N-糖链;
4. 使用GlycoWorkbench软件(CFG数据库)确定N-糖链;
5. 并根据相应糖基的质谱峰面积分析该种糖型的相对含量。
二. 蛋白质糖基化位点分析
1. 用多种酶对蛋白质进行酶解;
2. 于重标H218O中,采用PNGase F或多种的O-糖基酶,将目标蛋白中的糖基酶解下来,此时发生糖基化修饰的肽段将会带上一个18O;
3. 通过数据库检索,确定发生糖基化修饰的位点。
三. 糖基化位点及该位点糖型分析
1. 用多种酶对目标蛋白质进行酶解,尽可能完全的覆盖目标蛋白序列;
2. 将糖基酶切下来后,对该蛋白中的糖基化位点进行分析;
3. 确定发生糖基化修饰的肽段后,重新对目标蛋白进行酶解,并且保留肽段上的糖基;
4. 采用LC-MS/MS分析时,利用ETD\HCD\CID联合碎裂的方式,获得尽可能丰富的肽段二级碎裂信息;
5. 通过对糖基化修饰肽段二级图谱的软件分析以及人工鉴定,获得目标蛋白中糖基化位点及该位点糖型的准确信息。

联系我们
北京百泰派克生物科技有限公司
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