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技术资料/正文
泛素化定量蛋白组学研究
228 人阅读发布时间：2021-04-27 11:31
泛素化定量蛋白组学研究
BTP-泛素化定量蛋白组学研究
泛素化修饰是一种重要的翻译后修饰。泛素-蛋白酶体系统介导了真核生物体内80%~85%的蛋白质降解。此外，泛素化修饰还可以直接影响蛋白质的活性和定位，调控包括细胞周期、细胞凋亡、转录调控、DNA 损伤修复以及免疫应答等在内的多种细胞活动。百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台，Orbitrap Fusion质谱平台，Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，推出泛素化定量蛋白组分析服务技术包裹，您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的样品寄给我们，我们会负责项目后续所有事宜，包括蛋白提取、蛋白酶切、泛素化肽段富集、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。
由于翻译后修饰的蛋白质在生物样本中含量低、动态范围广，质谱分析前需要对修饰进行富集以提高其丰度，然后利用传统的定量蛋白组分析手段对富集得到的泛素化肽段样品进行定量分析。百泰派克公司基于发表在Nature Protocol上的文章：Large-scale identification of ubiquitination sites by mass spectrometry建立了该分析服务的实验平台，采用完全复制的方式；首先对泛素化的蛋白进行胰酶消化，在赖氨酸的修饰位点上会产生两个甘氨酸的残基(K-GG)，利用CST公司提供的针对该残基的试剂盒对泛素化肽段进行特异性的富集。我们使用HPLC对样品进行预分离，再使用抗特殊残基结构的抗体进行泛素化肽段的富集，极大地提高了泛素化蛋白的鉴定量。同时，在Nature Protocl文章基础上，为了鉴定和定量更多的乙酰化肽段，我们在酶切过程中会使用2-3中不同的酶对蛋白样品进行酶切，保证带有乙酰化位点的肽段以高离子化效率的方式进入质谱进行分析，排除因为肽段长度不合适、离子化效率低造成的乙酰化信息的丢失。
泛素化修饰研究路线
BTP-泛素化定量蛋白组学研究分析样品要求
1. 如果您提供的是组织样品，请您干冰将组织样品寄给我们；植物组织样本大于400mg，血液样品至少2ml(血浆注意用EDTA防凝)，血清2ml，尿液10ml，动物组织样品至少2g，细胞样品为1X10^8个细胞，酵母、微生物等干重400mg。2. 如果您提供的是蛋白样品，请您保证蛋白总量在2-5mg；蛋白提取时使用普通的组织、细胞裂解液即可。
3. 样品运输：请使用足量的干冰运输，并且尽量选用较快的邮递方式，以降低运输过程中样品降解的可能性。
4. 在正式实验之前，我们都会对您提供的样品进行检测，检测合格后开始正式试验。
BTP-泛素化定量蛋白组学研究案例
中/英文项目报告
在技术报告中，百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告，报告包括：1. 实验步骤（中英文）
2. 相关的质谱参数（中英文）
3. 鉴定的泛素化位点的详细信息
4. 质谱图片
5. 原始数据
BTP-泛素化定量蛋白组学一站式服务
您只需下单-寄送样品 百泰派克一站式服务完成：样品处理-上机分析-数据分析-项目报告How to order?
联系我们：
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邮箱：market@biotech-pack.com
地址：北京市经济技术开发区科创六街88号院
关于百泰派克
北京百泰派克生物科技有限公司（Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP）成立于2015年，是国家级高新技术企业，业务范围主要围绕蛋白和小分子代谢物检测两大板块，从事蛋白质和小分子代谢物的理化性质分析及结构解析等相关技术服务，为客户提供高性价比、高效率的技术服务。深耕蛋白鉴定、定量蛋白组（iTRAQ/TMT、label free、DIA/SWATCH）、PRM靶蛋白定量、蛋白和抗体测序、蛋白修饰（二硫键、糖基化、磷酸化、乙酰化、泛素化等）、靶向和非靶向代谢物检测。百泰派克生物科技检测平台包括：检测分析平台、蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白质从头测序平台、生物制药分析平台和流式细胞多因子检测平台。公司拥有独立的质谱实验室、色谱实验室、细胞培养室和免疫学实验室，以及高分辨率质谱仪和高效液相色谱。目前已与国内外多家药物研发企业，以及哈佛大学、北京大学在内的国内外高校建立了合作关系，协助客户发表了多篇中英文文章，包括Cell等多家高水平期刊。
公司自主检测平台发展至今，已覆盖蛋白质组学、代谢组学、生物制药、生信分析等多组学检测平台，积累了丰富的实践经验，凭借专业的技术和优质的服务水平，客户覆盖北京大学、清华大学、中科院等多所知名院校，也与国内外多家药物研发企业建立合作关系。公司始终致力于为各科研院校、企业和机构提供高效、准确、高性价比的蛋白质（组）研究技术包裹，助力客户在基础研究、分子诊断及其他生命科学研究领域取得突破，为生命科学的发展做出贡献。
百泰派克技术平台
检测分析平台：多台高分辨率质谱仪、高效液相色谱、气相色谱，NMR。蛋白质组分析平台：Label-free、iTRAQ、SILAC、SWATH、MRM；蛋白质定性定量鉴定、蛋白质差异分析、发现疾病标记物、发现药物靶标。
代谢组分析平台：靶向代谢组学、非靶向代谢组学、脂质组学分析；通量达1000种代谢分子、代谢通路分析、代谢靶标鉴定。流式细胞多因子检测平台：CBA、FlowCytomix；微量样品需求，分析多种细胞因子。
蛋白质从头测序平台：Obitrap Fusion Lumos质谱仪、PEAKS软件分析；100%序列测定，精准蛋白、抗体测序。
生物制药分析平台：生物药物鉴定、变异性分析、纯度分析。
流式细胞多因子检测平台：CBA、FlowCytomix；微量样品需求，分析多种细胞因子。