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技术资料/正文
iTRAQ/TMT/MultiNotch定量蛋白组学分析
234 人阅读发布时间：2021-04-27 11:31
TMT/iTRAQ/MultiNotch定量蛋白组学分析
iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和TMT(Tandem Mass Tags)技术是分别由美国AB Sciex公司和Thermo Fisher公司研发的多肽体外标记定量技术。这两种技术采用多个（2-10）稳定同位素标签，特异性标记多肽的氨基基团进行串联质谱分析，能够同时比较多达10种不同样本中蛋白质的相对含量，可用于研究不同病理条件下或者不同发育阶段的组织样品中蛋白质表达水平的差异。对于可以传代的细胞样品来说，我们可以采取SILAC的方法完成对于细胞蛋白质组的标记过程，但是许多其他研究体系，比如组织样品以及不能进行传代培养的细胞来说，需要其他的标记方法来完成定量蛋白组学分析。TMT, iTRAQ等基于体外（in vitro）标记的定量方法应运而生。
iTRAQ标签包括三部分，如下图：
1. 报告基团（reporter group）：指示蛋白样品丰度水平。
2. 平衡基团（balance group）：平衡报告基团的质量差，使等重标签重量一致，保证标记的同一肽段m/z相同。
3. 肽反应基团（amine-specific reactive group)：能与肽段N端及赖氨酸侧链氨基发生共价连接，从而标记上肽段。
iTRAQ和TMT标签结构图来自不同样品的同一肽段经TMT/iTRAQ试剂标记后具有相同的质量数，并在一级质谱检测（MS1）中表现为同一个质谱峰。当此质谱峰被选定进行碎裂后，在二级质谱检测（MS2）中，不同的报告基团被释放，它们各自的质谱峰的信号强弱，代表着来源于不同样品的该肽段及其所对应的蛋白的表达量的高低。TMT/iTRAQ定量蛋白组学研究因其测定精准度高适应样品种类多，目前已有很广泛的应用。百泰派克在传统的TMT/iTRAQ分析技术的基础上，提供TMT/iTRAQ/MultiNotch MS分析技术，使用三级碎片报告离子进行定量，可进一步提高TMT/iTRAQ定量蛋白组学分析的精度，进一步提高定量准确性。
百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台，Orbitrap Fusio Lumos质谱平台结合Nano-LC，推出基于TMT/iTRAQ/MultiNotch MS的定量蛋白组分析服务技术包裹，您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的蛋白寄给我们，我们会负责项目后续所有事宜，包括蛋白酶切、肽段标价、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。
iTRAQ/TMT定量蛋白组学分析实验流程
iTRAQ 8-plex定量蛋白组学分析流程
iTRAQ/TMT定量蛋白组学分析技术特点
• 高通量定量蛋白分析：可以同时分析10个样品；适合大量临床样本，多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物• 体外标记，适用于分析组织，细胞，血液等多种样品
• 质谱分析灵敏度高，可检测较低丰度蛋白，大范围比较蛋白相对丰度
• 可与富集磷酸化等修饰肽段的方法联用，更准确研究翻译后修饰变化
iTRAQ/TMT定量蛋白组学分析样品要求
注意：样品运输请使用足量的干冰运输，并且尽量选用较快的邮递方式，以降低运输过程中样品降解的可能性。
中/英文项目报告
在技术报告中，百泰会为您提供详细的中英文双语版技术报告，报告包括：1, 实验步骤（中英文）; 2, 相关的质谱参数（中英文）; 3, 鉴定的氨基酸的详细信息; 4, 质谱图片; 5, 原始数据
How to order?
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地址：北京市经济技术开发区科创六街88号院
关于百泰派克
北京百泰派克生物科技有限公司（Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP）成立于2015年，是国家级高新技术企业，业务范围主要围绕蛋白和小分子代谢物检测两大板块，从事蛋白质和小分子代谢物的理化性质分析及结构解析等相关技术服务，为客户提供高性价比、高效率的技术服务。深耕蛋白鉴定、定量蛋白组（iTRAQ/TMT、label free、DIA/SWATCH）、PRM靶蛋白定量、蛋白和抗体测序、蛋白修饰（二硫键、糖基化、磷酸化、乙酰化、泛素化等）、靶向和非靶向代谢物检测。百泰派克生物科技检测平台包括：检测分析平台、蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白质从头测序平台、生物制药分析平台和流式细胞多因子检测平台。公司拥有独立的质谱实验室、色谱实验室、细胞培养室和免疫学实验室，以及高分辨率质谱仪和高效液相色谱。目前已与国内外多家药物研发企业，以及哈佛大学、北京大学在内的国内外高校建立了合作关系，协助客户发表了多篇中英文文章，包括Cell等多家高水平期刊。
公司自主检测平台发展至今，已覆盖蛋白质组学、代谢组学、生物制药、生信分析等多组学检测平台，积累了丰富的实践经验，凭借专业的技术和优质的服务水平，客户覆盖北京大学、清华大学、中科院等多所知名院校，也与国内外多家药物研发企业建立合作关系。公司始终致力于为各科研院校、企业和机构提供高效、准确、高性价比的蛋白质（组）研究技术包裹，助力客户在基础研究、分子诊断及其他生命科学研究领域取得突破，为生命科学的发展做出贡献。
百泰派克技术平台
检测分析平台：多台高分辨率质谱仪、高效液相色谱、气相色谱，NMR。蛋白质组分析平台：Label-free、iTRAQ、SILAC、SWATH、MRM；蛋白质定性定量鉴定、蛋白质差异分析、发现疾病标记物、发现药物靶标。
代谢组分析平台：靶向代谢组学、非靶向代谢组学、脂质组学分析；通量达1000种代谢分子、代谢通路分析、代谢靶标鉴定。流式细胞多因子检测平台：CBA、FlowCytomix；微量样品需求，分析多种细胞因子。
蛋白质从头测序平台：Obitrap Fusion Lumos质谱仪、PEAKS软件分析；100%序列测定，精准蛋白、抗体测序。
生物制药分析平台：生物药物鉴定、变异性分析、纯度分析。
流式细胞多因子检测平台：CBA、FlowCytomix；微量样品需求，分析多种细胞因子。