甲基化分析

甲基化分析是一种用于检测和研究DNA、RNA和蛋白质甲基化的实验方法。蛋白质甲基化涉及将甲基基团添加到蛋白质的特定氨基酸残基上，通常是赖氨酸或精氨酸。这种修饰对蛋白质的功能、相互作用和定位有重要影响。以下是几种常用的蛋白质甲基化分析技术：

图1. 甲基化定量蛋白组学研究

• 用途: 质谱分析是识别和定量蛋白质甲基化的主要方法。它可以提供关于甲基化位点、甲基化程度和甲基化动态的详细信息。
• 过程: 蛋白样品经消化、离子化后，通过质谱仪分析。软件用于数据分析，以识别甲基化位点。

• 用途: 使用特异性抗体富集甲基化的蛋白或肽段，可以用于后续的质谱分析或西方印迹。
• 过程: 利用针对特定甲基化位点的抗体（例如特异性的赖氨酸或精氨酸甲基化抗体）来捕获甲基化蛋白。

• 用途: 西方印迹用于检测样品中甲基化蛋白的存在和丰度。
• 过程: 利用针对甲基化位点的抗体进行蛋白检测，可以定性地分析甲基化水平。

• 用途: 通过分离修饰和未修饰的蛋白形式，可以观察甲基化如何影响蛋白的等电点和分子量。
• 过程: 蛋白质首先按等电点分离，然后按分子量分离，通过染色或西方印迹可视化。

• 用途: 用于研究甲基化如何影响蛋白质间的相互作用。
• 过程: 利用标记的蛋白质，监测甲基化状态改变时的能量转移变化。